久久人人妻人人做人人爽,久久精品国产网红主播,午夜亚洲av日韩av无码大全,国产精品久久久久高潮

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章>組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟

組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟

更新時(shí)間:2016-12-30   點(diǎn)擊次數(shù):1895次

組織研磨機(jī)對(duì)提取小鼠尾巴RNA的實(shí)驗(yàn)步驟


實(shí)驗(yàn)步驟

1、首先將上海凈信的組織研磨機(jī)上的制冷模塊預(yù)先置于-20℃,使用時(shí)取出安裝好。將研磨珠去RNA酶處理。

2、隨機(jī)抽取小鼠的尾巴100µg,把樣本剪成盡可能小段,置于無RNA酶的2研磨單位離心管中(選擇耐液氮冷凍管子),同時(shí)加入1顆5號(hào)研磨珠和2顆3號(hào)研磨珠(如果選擇1.5研磨單位離心管,只需要加入4-5顆3號(hào)研磨珠)。

3、放置于液氮中一起浸泡3分鐘,取出放置于預(yù)冷模塊中,在全自動(dòng)樣品研磨儀上選擇13單位頻振研磨60s。(該步驟可以根據(jù)研磨的細(xì)微程度要求可以再重復(fù)一遍)

4、把研磨好的樣本加入0.06ml的PBS0.14ml的RNAiso Plus(此處選擇PBS,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入其他提取液,如1ml TRIzol等),繼續(xù)置于研磨機(jī)上選擇13單位頻振研磨60s。樣本將處于糊狀。(其他提取試劑有可能會(huì)出現(xiàn)泡沫,不影響實(shí)驗(yàn))

5、取出研磨管,放入冷凍離心機(jī)中,于4度,12000g離心10分鐘

6、小心吸取上清液0.1ml至新的1.5研磨單位離心管中,蓋上管蓋,在室溫上孵育15分種,使樣品充分裂解至勻漿液較透明,如果仍有少量顆粒屬于正常情況,不影響RNA提取質(zhì)量和得率。

7、在1.5研磨單位離心管中加入0.02ml氯(空)仿,蓋緊管蓋,振蕩混勻并將其在冰上孵育15分種,于4度,12000g離心15分鐘。離心后混合物分層:上清層,中間層,下層;RNA存在于上清層中。

8、將上清層小心轉(zhuǎn)移到一干凈的離心管中,加入等體積冰浴的異丙醇,顛倒振蕩混勻,將混合的樣品在-20度條件,孵育20分種,于4度,12000g離心10分鐘。RNA沉淀通常形成片狀沉淀附著于管壁或管底。

小心棄去上清,用1ML的冰浴75%的乙醇洗滌RNA沉淀一次,顛倒洗滌離心管管壁,并旋渦振蕩樣品,盡可能讓沉懸浮,于4度,12000g離心5分鐘,再次去除上清,晾干沉淀。

10、操作的zui后,在陰涼處適度干燥RNA沉淀(避免過分干燥,那樣會(huì)降底它的可溶性)。

11、用適量(一般可用0.01—0.02ml)的無RNA酶水或TE溶液來溶解RNA。抽提好的RNA,保存于-70度。

網(wǎng)站首頁 關(guān)于我們 新聞中心 產(chǎn)品中心 聯(lián)系我們
備案號(hào):浙ICP備14014839號(hào)-1   GoogleSitemap   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸
©2024  衢州新芝生物科技有限公司(m.hfzbbs.com) 版權(quán)所有 總訪問量:349383

浙公網(wǎng)安備 33080202000501號(hào)

伊人久久大香线蕉综合影院首页| 久久久久国色av免费观看性色| 无码AV免费毛片一区二区| 亚洲jizzjizz中国少妇中文| 深夜特黄A级毛片免费视频| 亚洲AV元码天堂一区二区三区| 亚洲旡码欧美大片| 国产强奷在线播放| 精品日产A一卡2卡三卡4卡3卡| 97色偷偷色噜噜男人的天堂| 人妻av乱片av出轨| 韩国乱码卡一卡二4399| 熟妇人妻中文字幕| 亚洲国产第一站精品蜜芽| 亚洲日本VA一区二区三区| 国产美女视频免费观看的网站| 亚洲AV永久无码嘿嘿嘿| 欧洲精品码一区二区三区| 国产综合精品一区二区三区| 福利100合集 在线播放| 太大太长又硬放进去很爽| 18无码粉嫩小泬无套在线观看| 国产尺码和欧洲尺码对比| 国产高清在线精品二区| 国产成人精品无码免费播放| 在线观看国产成人av片| 国产精品美女一区二区三区| 色先锋资源久久综合5566| 国产精品美女www爽爽爽视频| 国产情侣激情在线对白| 国产综合久久久久鬼色| 玩弄少妇肉体到高潮动态图| 国产亚洲综合一区二区三区| a级毛片免费网站| 丰满少妇被猛烈进入| 色悠久久久久综合网伊| 久久久久99精品成人片牛牛影视| 亚洲av色区一区二区三区| 欧美激情办公室videos| 天天摸夜夜摸夜夜狠狠摸| 亚洲人成无码网站18禁|